Invitrogen™ MICROB Express™ Bacterial mRNA Enrichment Kit

MICROB Express™ Bacterial mRNA Enrichment Kit er til oprensning af bakteriel mRNA ved at fjerne rRNA fra totalt RNA. Tilstrækkelige reagenser til 20 mRNA-oprensninger, hver fra 10μ g total RNA tilvejebringes. Funktioner i MICROB Express ™Kit:

• Øg dramatisk følsomheden af array-analyser og andre procedurer
• Fjerner> 95 % af 16S og 23S rRNA fra bakterielt RNA
• Enkel procedure tager mindre end 2 timer
• Virker med mange Gram-positive og Gram-negative bakterier

Hurtig oprensning af bakteriel mRNA Isolering af
mRNA fra bakterier har været praktisk talt umulig indtil nu. MICROB Express ™Kit bruger en ny teknologi til at fjerne> 95 % af 16S og 23S rRNA fra totalt RNA fra E. coli og andre bakteriearter. Sættet er velegnet til mRNA-oprensning fra et bredt spektrum af grampositive og gramnegative bakterier. mRNA'et isoleret med MICROB Express ™Kit er en overlegen skabelon til syntetisering af mærket cDNA til array-analyse og er ideel til kvantitativ RT-PCR, nordlige applikationer og cDNA-bibliotekskonstruktion. Effektiv fjernelse af 16S og 23S rRNA fra bakterielt RNA øger dramatisk følsomheden i nedstrømsprocedurer (se figur).

Start med en hvilken som helst total RNA-prøve.
Denne værts-bakteriecelle-total-RNA-blanding kan opnås ved en række forskellige RNA-isoleringsmetoder. MICROB Express ™Kit fjerner specifikt rRNA'er; små RNA'er (dvs. tRNA og 5S rRNA) fjernes ikke. Brug af totalt RNA, der mangler små RNA'er, som udgangsmateriale til MICROB Express ™Kit giver det højest mulige niveau af mRNA-berigelse (se tilbehørsprodukter). I det første trin af MICROB Express ™Kit-proceduren blandes total-RNA med et optimeret sæt indfangningsoligonukleotider, der binder til bakterien 16S og 23S rRNA'er. Derefter fjernes rRNA-hybriderne fra opløsningen ved hjælp af derivatiserede magnetiske mikroperler. mRNA'et forbliver i supernatanten og genvindes ved ethanolpræcipitation.

Tilbehørsprodukter Et magnetisk
stativ er påkrævet for at bruge dette sæt. De fås i flere formater, herunder enkeltsteds magnetstativ (kat. nr. AM10026), 6-rørs magnetstativ (kat. nr. AM10055) og magnetisk stativ med 96 brønde (kat. nr. AM10027 og AM10050). RiboPure™ -Bacteria Kit (Kat. nr. AM1925) er ideelt til oprensning af totalt RNA, der mangler små RNA'er. Små RNA'er kan fjernes fra totalt RNA ved hjælp af MEGAclear™ Sæt (Kat. Nr. AM1908).