Invitrogen™ Ambion™In vivo faktor VII positiv kontrol siRNA

Ambion™In vivo siRNA kontroller

• Validerede siRNA-kontroller til optimering af siRNA-eksperimenter rettet mod kodende og ikke-kodende transkripter
• Positiv kontrol siRNA'er testet funktionelt i flere almindelige cellelinjer
• Negative kontroller er funktionelt bevist at have minimal indvirkning på celleproliferation og levedygtighed
• Omfatte Silencer™ Vælg ændringer for forbedret specificitet eller Ambion™ In Vivo-modifikationer for øget stabilitet
• Til brug i museceller

Hvad er Ambion™ In vivo siRNA'er?

Ambion™In Vivo siRNA'er er designet ved hjælp af den gennemprøvede Silencer™ Vælg algoritme og inkorporer kemiske modifikationer for overlegen serumstabilitet med in vivo levering. Den tilføjede serumstabilitet kompromitterer ikke siRNA'ernes ydeevne. Ambion™In vivo siRNA'er har vist sig at være ikke-toksiske in vivo (mus) og ikke-immunogene (cellebaserede assays). I cellebaserede assays, Ambion™In Vivo udviser siRNA'er tilsvarende eller bedre styrke end Silencer™ Vælg siRNA'er. Resultatet er bedre tillid til dine in vivo RNAi-eksperimenter, bedre knockdown, når det parres med en effektiv leveringsløsning, og forsikringen om begrænsede ikke-specifikke effekter.

Faktor VII (FVII) Positiv kontrol siRNA

Ambion™In Vivo Faktor VII siRNA, In Vivo Ready, giver en positiv kontrol for eksperimenter, der involverer Ambion™In Vivo siRNA levering til mus. Faktor VII (FVII/F7; også kendt som proconvertin) er en vitamin K-afhængig serinprotease, der fungerer som et centralt protein i koagulationskaskaden. FVII syntetiseres i leveren og udskilles til plasmaet, hvor det cirkulerer i en inaktiv form. Efter levering af FVII-målrettet siRNA til leveren kan knockdown måles ved at kvantificere FVII-proteinniveauer i blod ved hjælp af robuste, kommercielt tilgængelige kromogene assays. Desuden kan blodprøver indsamles fra det samme dyr på flere tidspunkter efter siRNA-injektion. Disse funktioner muliggør meget hurtigere og mere effektive knockdown-målinger for FVII end for genmål, der kræver kvantificering af mRNA-niveauer i levervæv, hvilket gør FVII til en ideel kontrol for in vivo siRNA-levering.

Kvalitetskontrol

Ambion™ syntetiserer og renser hver Ambion™In Vivo siRNA i state-of-the-art faciliteter for at opfylde de højeste kvalitetsstandarder. Som en del af vores strenge kvalitetskontrolprocedurer analyseres hvert RNA-oligonukleotid ved MALDI-TOF massespektrometri, og analytisk HPLC bruges til at overvåge renhed. For at give den højeste kvalitet vurderer vi også hvert annealet siRNA ved gelelektroforese for at bekræfte, at strengene annealer korrekt. Resultatet er førsteklasses siRNA, der er renset og klar til brug.

In Vivo klar kontrol

Vores 'In Vivo Ready' kontrol siRNA'er udsættes for det ekstra niveau af oprensning og testning, der kræves for at indføre siRNA'er i dyr. Efter HPLC-oprensning og annealing oprenses hver siRNA yderligere ved hjælp af en proces, der fjerner overskydende salt via en semipermeabel membran. Resultatet er højrent siRNA med minimalt saltindhold, velegnet til in vivo applikationer. In vivo siRNA'er sterilfiltreres derefter og testes for tilstedeværelsen af endotoksin. Ved koncentrationer på 50μ M i nærvær af deioniseret vand, in vivo Ready siRNA'er indeholder mindre end 5,0 mM Na ⁺ , mindre end 0,06 mM K ⁺ og mindre end 0,02 mM Mg2 ⁺ .