Invitrogen™ Ambion™In vivo faktor VII positiv kontrol siRNA

Hvad er Ambion™ In Vivo siRNA'er?
Ambion™ In vivo siRNA'er er designet ved hjælp af den velafprøvede Silencer™ Select-algoritme og indeholder kemiske modifikationer for bedre serumstabilitet ved in vivo-levering. Den øgede serumstabilitet kompromitterer ikke siRNA'ernes ydeevne.Ambion™ In vivo siRNA'er har vist sig at være ikke-toksiske in vivo (mus) og ikke-immunogene (cellebaserede assays). I cellebaserede assays Ambion™ udviser In vivo siRNA'er tilsvarende eller bedre potenti end Silencer™ Select siRNA'er. Resultatet er bedre tillid til dine in vivo RNAi-eksperimenter, bedre nedslagning når de kombineres med en effektiv leveringsløsning, og sikkerhed for begrænsede uspecifikke effekter.

Faktor VII (FVII) Positiv kontrol siRNA
Ambion™ In Vivo Faktor VII siRNA, In Vivo Ready, giver en positiv kontrol for eksperimenter, der involverer Ambion™ In Vivo siRNA-levering til mus. Faktor VII (FVII/F7; også kendt som proconvertin) er en vitamin K-afhængig serinprotease, der fungerer som et centralt protein i koagulationskaskaden. FVII syntetiseres i leveren og udskilles til plasmaet, hvor det cirkulerer i en inaktiv form. Efter levering af FVII-målrettet siRNA til leveren kan knockdown måles ved at kvantificere FVII-proteinniveauer i blodet ved robuste, kommercielt tilgængelige kromogene analyser. Desuden kan blodprøver indsamles fra det samme dyr på flere tidspunkter efter siRNA-injektion. Disse egenskaber muliggør langt hurtigere og mere effektive knockdown-målinger for FVII end for genmål, der kræver kvantificering af mRNA-niveauer i levervæv, hvilket gør FVII til en ideel kontrol for in vivo siRNA-levering.

Kvalitetskontrol
Ambion™ syntetiserer og renser hvert In Ambion™ Vivo siRNA i topmoderne faciliteter for at opfylde de højeste kvalitetsstandarder. Som en del af vores strenge kvalitetskontrolprocedurer analyseres hvert RNA-oligonukleotid med MALDI-TOF massespektrometri, og analytisk HPLC bruges til at overvåge renheden. For at opnå den højeste kvalitet vurderer vi også hvert annealeret siRNA ved gelelektroforese for at bekræfte, at strengene gløder korrekt. Resultatet er premium kvalitets siRNA, der er renset og klar til brug.

In vivo-klare kontroller
Vores 'In Vivo Ready' kontrol-siRNA'er udsættes for det ekstra niveau af rensning og testning, der kræves for at indføre siRNA'er i dyr. Efter HPLC-rensning og udglødning bliver hvert siRNA yderligere renset ved hjælp af en proces, der fjerner overskydende salt via en semipermeabel membran. Resultatet er meget rent siRNA med minimalt saltindhold, egnet til in vivo-applikationer. In vivo siRNA'er filtreres derefter sterilt og testes for tilstedeværelse af endotoksin. Ved koncentrationer på 50 μM i nærvær af deioniseret vand indeholder in vivo Ready siRNA'er mindre end 5,0 mM Na⁺, mindre end 0,06 mM K⁺ og mindre end 0,02 mM Mg²⁺.