Invitrogen™ Ambion™ DNase I (RNase-fri)

DNase I fungerer ved at hydrolysere phosphodiester-bindinger, der producerer mono- og oligonukleotider med 5'-phosphat- og 3'-hydroxylgruppe. RNase-fri DNase I anbefales til at nedbryde DNA i tilstedeværelse af RNA, i fravær af RNase er afgørende for at opretholde integriteten af RNA. For eksempel bruges DNase I ofte til at fjerne template-DNA efter in vitro-transkription og til at fjerne kontaminerende DNA i totale RNA-præparater (især dem fra transficerede celler, der kan indeholde plasmid-DNA), der anvendes til ribonukleasebeskyttelsesassays, cDNA-bibliotekskontraktion og RT-PCR.

• Testet for kontaminerende RNase- og proteaseaktivitet
• Funktionalitet bestemmes ved fordøjelse af humant genomisk DNA efterfulgt af kvantitativ realtids-PCR for at påvise ufordøjet DNA
• Kræver bivalente kationer (Mg ²⁺ og Ca ²⁺ ved henholdsvis ca. 5 mM og 0,5 mM) for maksimal aktivitet og har et pH-optimum på 7,8
• Enhedsdefinition: En enhed er mængden af enzym, der kræves for fuldstændigt at nedbryde μ1 g DNA på 10 min. ved °37 C, og svarer til 0,04 Kunitz-enheder

For et alternativ til bovin DNase I, bedes du overveje rekombinant DNase I (fabrikant nr. AM2235). For en mere aktiv, salt-tolerant DNase, se venligst TURBO™ DNase-produkter (fabrikant nr. AM2239 og AM2238).

PCR& Real-Time PCR, Real Time PCR (qPCR), Reverse Transcription