Invitrogen™ Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit

Ligesom andre medlemmer af Cells-to-CT™ produktfamilie, den Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit gør det muligt at udføre ekspressionsanalyse direkte fra dyrkede celler uden RNA-oprensning.

Denne nye tilføjelse til familien inkluderer en TaqMan™ 1-Step RT-PCR master mix. Enkeltrørsformatet i RT-PCR-trinnet strømliner arbejdsgangen 'sample to answer' mere end nogensinde. Kombination af de simple celler-til- CT™ lysis-teknologi med den hurtige cykliske kapacitet i 1-trins RT-PCR-mastermixet giver hurtigere tid til resultater med begrænset prøvehåndtering.

De Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Sættet er:

• Komplet —optimeret arbejdsgang inkluderer cellelysereagenser med gDNA-fjernelse og TaqMan™ 1-Step RT-PCR Master Mix
• Hurtigere end nogensinde —før 7-minutters prøveforberedelse, inklusive DNase-behandling, kombineret med et 28-minutters RT-PCR-trin i realtid giver mulighed for∼ 35 minutters prøve-til-svar-workflow
• Simple —10 trin i alt (prøveforberedelse og real-time RT-PCR kombineret)
• Robust —genekspressionsanalyse på 10 100.000 celler –pr. prøve; resultater svarende til dem fra oprenset RNA
• Convenient —indeholder tilstrækkelige reagenser til at udføre 5 real-time RT-PCR'er for hver celleprøve, du forbereder; dette giver dig mulighed for at studere flere mål eller udføre replikerede RT-PCR'er

Note: TaqMan™ primer/probe sæt sælges separat.

Enkel 7-minutters prøveforberedelse, derefter klar til real-time RT-PCR

Uanset om du bruger plader eller rør, Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Sættet bruger en simpel 7-minutters prøveforberedelsesprocedure. Lyseringsteknologien er designet til 10 100.000 –dyrkede celler/prøve. Celler vaskes i PBS og lyseres i opløsning i 5 minutter ved stuetemperatur med en samtidig DNase-behandling. Lysering afsluttes ved stuetemperatur ved en 2-minutters inkubation med stopopløsning. Lysatet er nu klar til at analysere på dit PCR-instrument i realtid. Du skal blot tilføje det til en real-time RT-PCR-mastermix, der indeholder TaqMan™ primer-/probesæt af interesse. Alternativt kan lysatet opbevares kl– 20 °C. Fordi prøver kan behandles direkte i kulturbrønde (96 eller 384 brønde), minimeres prøvehåndtering og potentialet for prøvetab eller overførselsfejl, hvilket letter hurtig behandling med høj gennemstrømning. I modsætning til gammeldags RNA-isoleringsprotokoller med flere trin kræves ingen opvarmnings-, vask- eller centrifugeringstrin. Sættet forenkler i høj grad en besværlig –30 60 minutters proces og reducerer den til 7 minutter.

En komplet, valideret løsning

Alle komponenter i Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Sættet er optimeret til ensartet og pålidelig ydeevne. Dette fjerner gætteriet involveret i at samle separat prøveforberedelse og 1-trins RT-PCR-masterblandinger i realtid. For yderligere kvalitetssikring Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit er blevet valideret med TaqMan™ Genekspression analyserer og viser ydeevne svarende til den opnåede med oprenset RNA.

Tilbehørsprodukt

De TaqMan™ Cells-to-CT™ Kontrolsæt (kat. nr. 4386995) er designet til brug med TaqMan™ Cells-to-CT™ produkter. Dette kit indeholder en endogen kontrol (ACTB) til normalisering af prøvebelastningsvariabilitet og en kunstig XenoRNA™ kontrol og tilsvarende TaqMan™ Genekspressionsassay til at overvåge virkningerne af PCR-hæmning.