Molecular Probes™ Alexa Fluor™ Carboxylsyre, tris(triethylammonium) salte

Opdag fordelene ved Alexa Fluor farvestofserie Sammenlignet med
traditionelle farvestoffer, Alexa Fluor farvestoffer er lysere, mere fotostabile og mere pH-resistente mellem pH 4 og 10. Generelt ved brug Alexa Fluor farvestoffer, kan højere grader af mærkning opnås uden intramolekylær quenching.

Thermo Fisher Scientific tilbyder en række frie syrefarvestoffer, der anvender carboxylsyre-tris(triethylammonium)-salte til at give ikke-reaktive former af forskellige Alexa Fluor farvestoffer. Disse Alexa Fluor farvestoffer tilbydes som en fri syre, hvor du kan vælge mellem ti forskellige farver og bølgelængde-excitationer på tværs af fluorofor-spektret.

At være ukonjugeret og ikke-reaktiv, Alexa Fluor frie syrefarvestoffer kan ikke bruges til mærkning. Imidlertid, Alexa Fluor frie syremolekyler er nyttige til visualisering af injektionsstedet in vivo og kan bruges som referencestandarder for tilsvarende farvestof-konjugater i ethvert fluorescerende mærkningseksperiment. Gratis syre-formater af Alexa Fluor farvestoffer kan være nyttige kontroller til konfokal billeddannelse, ICC/IHC, HCS, flowcytometri og levende cellebilleddannelse.

For at rekonstituere, opløs Alexa Fluor carboxylsyreforbindelse i vandig buffer (f.eks. PBS) eller vandfrit dimethylsulfoxid af høj kvalitet (DMSO) eller dimethylformamid (DMF) i en slutkoncentration på 1 10 –mg/ml. Efter rekonstituering er denne opløsning stabil i 1 år, når den opbevares ved –2 °8 C og beskyttet mod lys.

Alexa Fluor muligheder for gratis syrefarve:
• Blå-fluorescerende Alexa Fluor 350 —excitations- og emissionsmaksima på 346/442 nm; exciteret ved hjælp af en 355-nm laserlinje og detekteret under standard DAPI-filtre. Alexa Fluor 350 bruges almindeligvis med Alexa Fluor 488, 594 og 647 farvestoffer til multipleksing.

•Grøn-fluorescerende Alexa Fluor 488 —excitations- og emissionsmaksima på 490/514 nm; exciteret ved hjælp af en 488-nm argon-laserlinje og detekteret under standard FITC/Cy2-filtre. Alexa Fluor 488 bruges almindeligvis med DAPI, Alexa Fluor 594 og 647 farvestoffer til multipleksing.

•Gul-grøn fluorescerende Alexa Fluor 532 —excitations- og emissionsmaksima på 528/548 nm; exciteret ved hjælp af en 532-nm Nd:YAG laserlinje og detekteret under standard rhodamine 6G filtre. Alexa Fluor 532 frit syrefarvestof har excitations- og emissionsspektre mellem dem for det grønne-fluorescerende Alexa Fluor 488 farvestof og den orange-fluorescerende Alexa Fluor 546 farvestof.

•Gul-fluorescerende Alexa Fluor 546 —excitations- og emissionsmaksima på 554/570 nm; exciteret ved hjælp af en 543-nm He-Ne laserlinje og detekteret under standard TRITC/Cy3 filtre. Alexa Fluor 546 tjener som et alternativ til tetramethylrhodamin eller Cy3 farvestof.

•Orange-fluorescerende Alexa Fluor 555 —excitations- og emissionsmaksima på 555/572 nm; exciteret ved hjælp af en 543-nm He-Ne laserlinje og detekteret under standard TRITC/Cy3 filtre. Alexa Fluor 555 er en anbefalet erstatning for Cy3 farvestof eller tetramethylrhodamin, med større fotostabilitet end Cy3 . Alexa Fluor 555 farvestof er almindeligt anvendt med DAPI, Alexa Fluor 488 og 647 farvestoffer til multipleksing.

•Orange-rød-fluorescerende Alexa Fluor 568 —excitations- og emissionsmaksima på 571/596 nm; exciteret ved hjælp af en 568-nm Ar-Kr blandet gaslaser og detekteret under standard RFP/Rhodamine Red/Cy3.5/Texas Red-filtre. Alexa Fluor 568 farvestof er almindeligt anvendt med DAPI, Alexa Fluor 488 og 647 farvestoffer til multipleksing.

• Rød-fluorescerende Alexa Fluor 594 —excitations- og emissionsmaksima på 585/610 nm; exciteret ved hjælp af en 594-nm Kr eller He-Ne laserlinje og detekteret under standard Texas Red-filtre. Alexa Fluor 594 er en direkte erstatning for Texas Red-farve med klart signal og fremragende fotostabilitet. Alexa Fluor 594 farvestof er almindeligt anvendt med DAPI, Alexa Fluor 488 og 647 farvestoffer til multipleksing.

•Dyb-rød-fluorescerende Alexa Fluor 633 —excitations- og emissionsmaksima på 620/640 nm; exciteret af 633 nm spektralinjen i He-Ne laseren eller 635 nm spektrallinjen af røde diode lasere. Denne og andre langt røde fluorescerende Alexa Fluor farvestoffer er vigtige for fluorescensbilleddannelse, fordi deres spektre er uden for rækkevidden af de fleste prøvers autofluorescens.

•Dyb-rød-fluorescerende Alexa Fluor 647 —excitations- og emissionsmaksima på 651/672 nm; exciteret ved hjælp af en 633- eller 635-nm Kr- eller He-Ne-laserlinje og detekteret under standard APC/Cy5-filtre. Alexa Fluor 647 farvestof er almindeligt anvendt med DAPI, og Alexa Fluor 488 og 594 farvestoffer til multipleksing.

• Nær-IR Alexa Fluor 750 —excitations- og emissionsmaksima på 753/783 nm; exciteret ved hjælp af 750 nm laserlinje og detekteret under standard Cy7 filtre. Alexa Fluor 750 er godt adskilt fra almindeligt anvendte langt røde fluoroforer som f.eks Alexa Fluor 647 eller APC.

Carboxylsyrederivater kan omdannes til en amin-reaktiv ester ved brug af standard kemiske teknikker eller koblet til hydraziner, hydroxylaminer og aminer i vandig opløsning under anvendelse af EDAC (Kat. nr. E2247). EDAC er et vandopløseligt carbodiimid, der kan bruges til at tværbinde biologiske stoffer, der indeholder carboxylatsyrer og primære aminer.