Molecular Probes™ Alexa Fluor™ 790 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

Alexa Fluor™ 790 er et lyst og fotostabilt nær-IR-farvestof, der spektralt ligner indocyaningrøn (ICG) og IRDye™ 800 farvestof. Anvendes til stabil signalgenerering i billeddannelse og flowcytometri, Alexa Fluor™ 790 farvestof er vandopløseligt og pH-ufølsomt fra pH 4 til pH 10. Fluorescens af denne lange bølgelængde Alexa Fluor™ farvestof er ikke synligt for det menneskelige øje, men detekteres let af de fleste billeddannelsessystemer. Som den længste bølgelængde Alexa Fluor™ farvestof, er emissionen godt adskilt fra almindeligt anvendte fjernrøde fluoroforer som f.eks Alexa Fluor™ 647 farvestof eller allophycocyanin (APC), hvilket letter flerfarveanalyse. Denne fluorofor forventes også at være nyttig til in vivo billeddannelse af små dyr (SAIVI ) applikationer eller til tofarvede westernapplikationer med LI-COR™ Odyssey™ infrarødt billedbehandlingssystem. Ud over reaktive farveformuleringer tilbyder vi Alexa Fluor™ 790 farvestof konjugeret til en række antistoffer, peptider, proteiner, sporstoffer og amplifikationssubstrater optimeret til cellulær mærkning og detektion. NHS-esteren (eller succinimidylesteren) af Alexa Fluor™ 790 er det mest populære værktøj til at konjugere dette farvestof til et protein eller antistof. NHS-estere kan bruges til at mærke til de primære aminer (R-NH₂) for proteiner, aminmodificerede oligonukleotider og andre aminholdige molekyler. Det resulterende Alexa Fluor™ konjugat vil udvise lysere fluorescens og større fotostabilitet end konjugaterne af andre spektralt lignende fluoroforer.

Detaljeret information om dette AlexaFluor™ NHS ester:

Fluorofor etiket: Alexa Fluor™ 790 farvestof
Reaktiv gruppe: NHS
esterreaktivitet: Primære aminer på proteiner og ligander, aminmodificerede
oligonukleotider Ex/Em af konjugatet: 784/814
nm ekstinktionskoefficient: 260.000 cm-1M-1
Spektralt lignende farvestoffer: indocyanin grøn (ICG) og IRDye™ 800 farvestof
Molekylvægt: ∼1750

Typisk konjugeringsreaktion Du
kan konjugere amin-reaktive reagenser med stort set ethvert protein eller peptid (den medfølgende protokol er optimeret til IgG-antistoffer). Du kan skalere reaktionen for enhver mængde protein, men koncentrationen af proteinet bør være mindst 2 mg/ml for at opnå optimale resultater. Vi anbefaler at prøve tre forskellige grader af mærkning ved at bruge tre forskellige molære forhold mellem det reaktive reagens og protein.

De Alexa Fluor™ NHS-ester opløses typisk i vandfrit dimethylformamid af høj kvalitet (DMF) eller dimethylsulfoxid (DMSO) (D12345), og reaktionen udføres i 0,–1 0,2 M natriumbicarbonatbuffer, pH 8,3, ved stuetemperatur i 1 time. Fordi pKa af den terminale amin er lavere end for lysinepsilon-aminogruppen, kan du opnå mere selektiv mærkning af aminterminalen ved at bruge en buffer tættere på neutral pH.

Konjugatoprensning Mærkede antistoffer
er typisk adskilt fra frie Alexa Fluor™ farve ved hjælp af en gelfiltreringskolonne, som f.eks Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 eller tilsvarende. For meget større eller mindre proteiner vælges et gelfiltreringsmedium med en passende molekylvægtsgrænse eller oprensning ved dialyse. Vi tilbyder flere oprensningssæt optimeret til forskellige mængder antistofkonjugat:
Antistofkonjugatoprensningskit til 0,5-1 mg (A33086)
Antistofkonjugatoprensningskit til 20-50μ g (A33087)
Antistofkonjugatoprensningskit til 50-100μ g (A33088)

Lær mere om protein- og antistofmærkning Vi tilbyder et
bredt udvalg af Molecular Probes™ antistof- og proteinmærkningssæt, der passer til dit udgangsmateriale og din eksperimentelle opsætning. Se vores antistofmærkningssæt eller brug vores værktøj til valg af mærkningskemi for andre valg. For at lære mere om vores mærkningssæt, læs sæt til mærkning af proteiner —og nukleinsyrer afsnit 1.2 i Molecular Probes™ Håndbog.

Vi ’laver et tilpasset konjugat til dig
Hvis du ’ikke kan finde ’det, du leder efter i vores onlinekatalog, vil ’vi forberede et tilpasset antistof- eller proteinkonjugat til dig. Vores tilpassede konjugationsservice er effektiv og fortrolig, og vi står ved kvaliteten af vores arbejde. Det er vi ISO 13485:2000 certificeret.