Molecular Probes™ Alexa Fluor™ 610-X NHS Ester (Succinimidyl Ester)

Alexa Fluor™ 610-X er en lys og fotostabil Texas Red™ farvestoferstatning. Anvendes til stabil signalgenerering i billeddannelse og flowcytometri, Alexa Fluor™ 610-X farvestof er vandopløseligt og pH-ufølsomt fra pH 4 til pH 10. Ud over reaktive farveformuleringer tilbyder vi Alexa Fluor™ 610 –R-Phycoerythrin tandem antistofkonjugater til flowcytometri. NHS-esteren (eller succinimidylesteren) af Alexa Fluor™ 610-X er det mest populære værktøj til at konjugere dette farvestof til et protein eller antistof. NHS-estere kan bruges til at mærke til de primære aminer (R-NH₂) for proteiner, aminmodificerede oligonukleotider og andre aminholdige molekyler. Det resulterende Alexa Fluor™ konjugat vil udvise lysere fluorescens og større fotostabilitet end konjugaterne af andre spektralt lignende fluoroforer.

Detaljeret information om dette AlexaFluor™ NHS ester:

Fluorofor etiket: Alexa Fluor™ 610-X farvestof
Reaktiv gruppe: NHS ester
Reaktivitet: Primære aminer på proteiner og ligander, aminmodificerede oligonukleotider
Ex/Em af konjugatet: 603/623 nm
Ekstinktionskoefficient: 144.000 cm-1M-1
Spektralt lignende farvestoffer: Texas Red™
Molekylvægt: 1284,8

Typisk konjugationsreaktion
Du kan konjugere amin-reaktive reagenser med stort set ethvert protein eller peptid (den medfølgende protokol er optimeret til IgG-antistoffer). Du kan skalere reaktionen for enhver mængde protein, men koncentrationen af proteinet bør være mindst 2 mg/ml for at opnå optimale resultater. Vi anbefaler at prøve tre forskellige grader af mærkning ved at bruge tre forskellige molære forhold mellem det reaktive reagens og protein.

De Alexa Fluor™ NHS-ester opløses typisk i vandfrit dimethylformamid af høj kvalitet (DMF) eller dimethylsulfoxid (DMSO) (D12345), og reaktionen udføres i 0,1 –0,2 M natriumbicarbonatbuffer, pH 8,3, ved stuetemperatur i 1 time. Fordi pKa af den terminale amin er lavere end for lysinepsilon-aminogruppen, kan du opnå mere selektiv mærkning af aminterminalen ved at bruge en buffer tættere på neutral pH.

Konjugatrensning
Mærkede antistoffer er typisk adskilt fra frie Alexa Fluor™ farve ved hjælp af en gelfiltreringskolonne, som f.eks Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 eller tilsvarende. For meget større eller mindre proteiner vælges et gelfiltreringsmedium med en passende molekylvægtsgrænse eller oprensning ved dialyse. Vi tilbyder flere oprensningssæt optimeret til forskellige mængder antistofkonjugat:
Antistofkonjugatoprensningskit til 0,5-1 mg (A33086)
Antistofkonjugatoprensningskit til 20-50μ g (A33087)
Antistofkonjugatoprensningskit til 50-100μ g (A33088)

Lær mere om protein- og antistofmærkning
Vi tilbyder et bredt udvalg af Molecular Probes™ antistof- og proteinmærkningssæt, der passer til dit udgangsmateriale og din eksperimentelle opsætning. Se vores antistofmærkningssæt eller brug vores værktøj til valg af mærkningskemi for andre valg. For at lære mere om vores mærkningssæt, læs sæt til mærkning af proteiner og nukleinsyrer —afsnit 1.2 i Molecular Probes™ Håndbog.

Vi ’laver et skræddersyet konjugat til dig
Hvis du ’ikke kan finde det, ’du leder efter, i vores onlinekatalog, vil vi ’forberede et tilpasset antistof eller proteinkonjugat til dig. Vores tilpassede konjugationsservice er effektiv og fortrolig, og vi står ved kvaliteten af vores arbejde. Det er vi ISO 13485:2000 certificeret.