Få mere at vide
Invitrogen™ Alexa Fluor™ 488 TFP ester
Log ind for at se lagerbeholdningen.
Beskrivelse
Alexa Fluor™ farvestoffer er reaktive molekyler, der kan bruges til at tilføje et fluorescerende mærke til de primære aminer (R- NH2 ) af proteiner, aminmodificerede oligonukleotider og andre aminholdige molekyler. Det resulterende Alexa Fluor™ konjugater udviser lysere fluorescens og større fotostabilitet end konjugaterne af andre spektralt lignende fluoroforer. Alexa Fluor™ 488 TFP-ester producerer et konjugat med excitation/emission på 495/515 nm, der spektralt ligner fluorescein (FITC) og Cy2 konjugater.
Alexa Fluor™ farvestoffer er tilgængelige med fluorescensemissioner, der spænder over det synlige og nær-infrarøde spektrum (se Alexa Fluor™ Dye Series Note 1.1 —i The Molecular Probes™ Håndbog) og giver den unikke kombination af vandopløselighed og pH-ufølsomhed mellem pH 4 og 10 for kompatibilitet i forskellige biologiske miljøer.
TFP (tetrafluorphenyl) estere er en forbedring i forhold til succinimidylester (SE eller NHS-ester) kemien, der typisk bruges til at binde fluoroforer eller haptener til de primære aminer i biomolekyler. Begge reaktive kemier producerer den samme stærke amidbinding mellem farvestoffet eller haptenet og forbindelsen af interesse, men TFP-estere er mindre modtagelige for spontan hydrolyse under konjugeringsreaktioner. Alexa Fluor™ TFP-estere er stabile i adskillige timer ved den basiske pH-værdi, der typisk bruges til –reaktioner, der er langt længere end succinimidylestere.
Typisk konjugeringsreaktion
Du kan konjugere aminreaktive reagenser med praktisk talt ethvert protein eller peptid; den medfølgende protokol er optimeret til IgG-antistoffer. Du kan skalere reaktionen for enhver mængde protein, men koncentrationen af proteinet bør være mindst 2 mg/ml for at opnå optimale resultater. Vi anbefaler at prøve tre forskellige grader af mærkning ved at bruge tre forskellige molære forhold mellem det reaktive reagens og protein.
De Alexa Fluor™ TFP-ester opløses typisk i vandfrit dimethylsulfoxid af høj kvalitet (DMSO) (D12345), og reaktionen udføres i 0,–1 0,2 M natriumbicarbonatbuffer, pH 8,3, ved stuetemperatur i 1 time. Fordi pKa af den terminale amin er lavere end for lysinepsilon-aminogruppen, kan du opnå mere selektiv mærkning af aminterminalen ved at bruge en buffer tættere på neutral pH.
Konjugatoprensning Mærkede antistoffer
er typisk adskilt fra frie Alexa Fluor™ farve ved hjælp af en gelfiltreringskolonne, som f.eks Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 eller tilsvarende. For meget større eller mindre proteiner, vælg et gelfiltreringsmedium med en passende molekylvægtsgrænse eller oprens ved dialyse.
Lær mere om protein- og antistofmærkning Vi
tilbyder et bredt udvalg af Molecular Probes™ antistof- og proteinmærkningssæt, der passer til dit udgangsmateriale og din eksperimentelle opsætning. Se Antistofmærkning fra A til Z eller brug vores værktøj til valg af mærkningskemi for andre valg. For at lære mere om vores mærkningssæt, læs sæt til mærkning af proteiner —og nukleinsyrer afsnit 1.2 i Molecular Probes™ Håndbog.
Vi ’laver et tilpasset konjugat til dig
Hvis du ’ikke kan finde ’det, du leder efter i vores onlinekatalog, vil ’vi forberede et tilpasset antistof- eller proteinkonjugat til dig. Vores tilpassede konjugationsservice er effektiv og fortrolig, og det er vi ISO 13485:2000 certificeret.
Tekniske data
Tekniske data
| Mængde | 3 x 100 μg |
| Produkttype | Farve |
| Indhold og opbevaring | 3 rør Opbevares udtørret ved -20 °C ved modtagelse |
| Forsendelsestilstand | Stuetemperatur |
| Produktlinje | Alexa Fluor |
| Emission | 515 nm |
| Excitation | 495 nm |
Må kun bruges til undersøgelsesformål. Må ikke anvendes ved diagnostiske procedurer.
Ved at klikke på Send, anerkender du, at du kan blive kontaktet af Fisher Scientific med hensyn til den feedback, du har givet i denne formular. Vi deler ikke dine oplysninger til andre formål. Alle angivne kontaktoplysninger skal også vedligeholdes i overensstemmelse med vores Privatlivspolitik.